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01 網織紅細胞計數實驗步驟(網織紅細胞計數)
Instagram刷粉絲, Ins買粉絲自助下單平台, Ins買贊網站可微信支付寶付款2024-07-29 06:03:14【】6人已围观
简介網織紅細胞計數采用的染色方法是【答案】:B網織紅細胞計數可使用普通光學顯微鏡法、網織細胞計數儀法和血細胞分析儀法。前者的原理是網織紅細胞經體外活體染色,其胞體內RNA的磷酸基帶有負電荷,能與新亞甲藍、
網織紅細胞計數采用的染色方法是
【答案】:B
網織紅細胞計數可使用普通光學顯微鏡法、網織細胞計數儀法和血細胞分析儀法。前者的原理是網織紅細胞經體外活體染色,其胞體內RNA的磷酸基帶有負電荷,能與新亞甲藍、煌焦油藍、中性紅等堿性染料帶正電荷的有色反應基團結合,后兩種方法與此不同,是用熒光染料(如吖啶橙、派若寧-Y)使網織紅細胞內RNA著色。因此,本題正確答案是B。
網織紅細胞計數
網織紅細胞 Miller;窺盤法;儀器法
Key words:Reticulocyte;Miller ocular;Analyzer
網織紅細胞是骨髓最新被釋放到外周血的成熟紅細胞的前提紅細胞,同成熟紅細胞相比,其細胞內仍殘存小量的RNA(嗜堿性物質),是反映骨髓造血功能的早期指標。目前測定網織紅細胞的自動分析儀主要有:多參數流式細胞儀(FCM),某些全自動血液分析儀,如:Sysmex-R系列分析儀,Miles H3型血液分析儀,Coulter Maxm型分析儀,Abbott CD3500血液分析儀[1,2]。國內多采用顯微鏡目測法。現將Sysmex-R3500分析儀,COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法的測定結果進行探討。
1 材料與方法
1.1 材料
(1)SYSMEX-R3500分析儀:日本希森美康株式會社生產。原裝試劑盒和質控物,批號分別是ZA9004,11130091。(2)COULTER MAXM 分析儀:美國COULTER 公司生產。原裝試劑盒和質控物,批號分別是109155,105379K。試劑盒由試劑A與試劑B組成,其主要成分分別是0.06%新亞甲藍與0.08%硫酸。(3)Miller窺盤法的試劑盒:由TONYAR DIAGNOSTICS.INC生產的ASK BCB Solution,批號A10。成分為焦油藍4 g/L與氯化鈉9 g/L。
1.2 方法
(1)SYSMEX-R3500分析儀測定原理:熒光染料堿性槐黃(或者全胺O)(Auramine O,AO)與網織紅細胞內RNA結合,以氬激光束為光源進行測定。操作步驟:混勻血液,直接測定網織紅細胞。(2)COULTER MAXM 分析儀測定原理:血液標本與新亞甲藍孵育活體染色,加入酸性試劑,使紅細胞內的血紅蛋白溢出,保存被染色的RNA于細胞內,細胞通過測定體積,高頻傳導性以及激光散射(VCS)而進行分析,測定出網織紅細胞。操作步驟:向A管加入4滴與50 μl血液標本,混勻,室溫16℃~30℃放置5 min~60 min.取A管液體2 μl于B管,加入試劑B液2 ml,等30 s,手動進樣檢測。(3)Miller窺盤法原理:煌焦油藍活體染色法。操作步驟:見全國臨床檢驗操作規程。為了重復性好,CV值較低,本次實驗采取了計數500個紅細胞內的網織紅細胞百分數。(4)測定SYSMEX-R3500,COULTER MAXM的批內,批間精密度,并與Miller窺盤法進行比較。分別用SYSMEX-R3500分析儀,COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法對130份正常人標本進行網織紅細胞測定,方差分析統計結果
一位熟練的檢驗工作人員對同一標本用Miller窺盤法重復測定15次,結果如下:均值=1.177 5(0.52~1.89),S=0.321 9,CV(%)=27.34。
2.7 用SYSMEX-R3500分析儀,COULTER MAXM分析儀,顯微鏡目測法(Miller窺盤法)同時測定130份血常規在正常范圍的標本。結果F=3.87,P<0.05,差異有顯著性。差異性分析(見表6),相關性分析(見表7)。表6 差異性分析(略)表7 直線相關性分析(略)注:※差異無顯著性,★差異有顯著性,★★差異有極顯著性,△相關。
采用miller窺盤法計數網織紅細胞時
如果我沒算錯,答案應該是0.014
有道公式:Ret%=(大方格內Ret/小方格內RBC*9)*100%
貓網織紅細胞計數公式
網織紅細胞分數=(計數的網織紅細胞數)/1O00,網織紅細胞絕對值(×109/L)=紅細胞數×1012/L×網織紅細胞分數。
網織紅細胞(RETIC)是未成熟的紅細胞,能夠反應新生紅細胞的“最新消息”,所以網織紅細胞(RETIC)是骨髓對紅細胞生成需求增加的反應性最客觀的指標。對于貧血病例,網織紅細胞計數是不可或缺的指標。
貓,屬于貓科動物,分家貓、野貓,是全世界家庭中較為廣泛的寵物。
家貓的祖先據推測是古埃及的沙漠貓,波斯的波斯貓,已經被人類馴化了3500年(但未像狗一樣完全地被馴化)。
如何對網織紅細胞顯微鏡計數法進行質量控制?
①目前網織紅細胞顯微鏡計數誤差較大,應首選Miller窺盤計數;②用煌焦油藍乙醇染液時,應待乙醇完全揮發干后方能加入血液,否則可使血液凝固;③染色時間一定要充足;④染色時溫度控制在37℃為宜;⑤試管法檢測網織紅細胞時染液與血液的比例以1:1為宜,嚴重貧血時,可適量增加血液的比例;制片時血膜不宜太薄或太厚,否則會造成網織紅細胞分布不勻
手工法網織紅細胞顯微鏡計數法,染色液可為
正確答案:D
解析:用于網織紅細胞計數的染液有煌焦油藍、新亞甲藍、中性紅
。
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