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01 網織紅細胞計數的實驗目的(網織紅細胞計數采用的染色方法是)
Instagram刷粉絲, Ins買粉絲自助下單平台, Ins買贊網站可微信支付寶付款2024-06-28 11:23:11【】4人已围观
简介影響網織紅細胞計數的因素有哪些影響網織紅細胞計數標準性的因素為染液的質量、計數紅細胞的個數、染色溫度和時間、網織紅細胞的辨認水平。網織紅細胞計數:(一)原理網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的
影響網織紅細胞計數的因素有哪些
影響網織紅細胞計數標準性的因素為染液的質量、計數紅細胞的個數、染色溫度和時間、網織紅細胞的辨認水平。網織紅細胞計數:
(一)原理網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的紅細胞,胞質中尚有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質殘存,經煌焦油藍或新亞甲藍活體染色后,胞質中可見藍或藍綠色枝點狀甚至網織狀結構。
(二)方法活體染色法.近年來還可通過某些血液自動分析儀及流式細胞術檢測法進行網織紅細胞計數。
(三)參考值(活體染色法)
成人和兒童:0.005-0.015
新生兒:0.02-0.06
網織紅細胞絕對值:(24-84)×10^9/L
(四)臨床意義
網織紅細胞計數反應骨髓造血功能的重要指標。
網織紅細胞增多表示骨髓紅系增生旺盛,常見于溶貧、急性失血、缺鐵貧、巨幼貧等,網織紅細胞減少表示骨髓造血功能減低,常見于再障、骨髓病性貧血。
網織紅細胞計數
網織紅細胞 Miller;窺盤法;儀器法
Key words:Reticulocyte;Miller ocular;Analyzer
網織紅細胞是骨髓最新被釋放到外周血的成熟紅細胞的前提紅細胞,同成熟紅細胞相比,其細胞內仍殘存小量的RNA(嗜堿性物質),是反映骨髓造血功能的早期指標。目前測定網織紅細胞的自動分析儀主要有:多參數流式細胞儀(FCM),某些全自動血液分析儀,如:Sysmex-R系列分析儀,Miles H3型血液分析儀,Coulter Maxm型分析儀,Abbott CD3500血液分析儀[1,2]。國內多采用顯微鏡目測法。現將Sysmex-R3500分析儀,COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法的測定結果進行探討。
1 材料與方法
1.1 材料
(1)SYSMEX-R3500分析儀:日本希森美康株式會社生產。原裝試劑盒和質控物,批號分別是ZA9004,11130091。(2)COULTER MAXM 分析儀:美國COULTER 公司生產。原裝試劑盒和質控物,批號分別是109155,105379K。試劑盒由試劑A與試劑B組成,其主要成分分別是0.06%新亞甲藍與0.08%硫酸。(3)Miller窺盤法的試劑盒:由TONYAR DIAGNOSTICS.INC生產的ASK BCB Solution,批號A10。成分為焦油藍4 g/L與氯化鈉9 g/L。
1.2 方法
(1)SYSMEX-R3500分析儀測定原理:熒光染料堿性槐黃(或者全胺O)(Auramine O,AO)與網織紅細胞內RNA結合,以氬激光束為光源進行測定。操作步驟:混勻血液,直接測定網織紅細胞。(2)COULTER MAXM 分析儀測定原理:血液標本與新亞甲藍孵育活體染色,加入酸性試劑,使紅細胞內的血紅蛋白溢出,保存被染色的RNA于細胞內,細胞通過測定體積,高頻傳導性以及激光散射(VCS)而進行分析,測定出網織紅細胞。操作步驟:向A管加入4滴與50 μl血液標本,混勻,室溫16℃~30℃放置5 min~60 min.取A管液體2 μl于B管,加入試劑B液2 ml,等30 s,手動進樣檢測。(3)Miller窺盤法原理:煌焦油藍活體染色法。操作步驟:見全國臨床檢驗操作規程。為了重復性好,CV值較低,本次實驗采取了計數500個紅細胞內的網織紅細胞百分數。(4)測定SYSMEX-R3500,COULTER MAXM的批內,批間精密度,并與Miller窺盤法進行比較。分別用SYSMEX-R3500分析儀,COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法對130份正常人標本進行網織紅細胞測定,方差分析統計結果
一位熟練的檢驗工作人員對同一標本用Miller窺盤法重復測定15次,結果如下:均值=1.177 5(0.52~1.89),S=0.321 9,CV(%)=27.34。
2.7 用SYSMEX-R3500分析儀,COULTER MAXM分析儀,顯微鏡目測法(Miller窺盤法)同時測定130份血常規在正常范圍的標本。結果F=3.87,P<0.05,差異有顯著性。差異性分析(見表6),相關性分析(見表7)。表6 差異性分析(略)表7 直線相關性分析(略)注:※差異無顯著性,★差異有顯著性,★★差異有極顯著性,△相關。
簡述網織紅細胞計數的臨床意義。
(1)判斷骨髓的造血功能:①網織紅細胞增多:表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性貧血、急性失血性貧血時網織紅細胞可明顯增高;缺鐵性貧血和巨幼細胞性貧血時,網織紅細胞正常或輕度增高;②網織紅細胞減少:表示骨髓造血功能低下,多見于再生障礙性貧血。
(2)作為貧血治療的療效觀察指標:缺鐵性貧血和巨幼細胞性貧血的患者治療后,網織紅細胞升高說明治療有效,貧血愈嚴重,網織紅細胞升得越高,而且其升高在紅細胞和HB升高之前;反之,如果網織紅細胞不見增高,說明治療無效或骨髓造血功能有障礙。
(3)骨髓移植后監測骨髓造血恢復情況。
網織紅細胞計數采用的染色方法是
【答案】:B
網織紅細胞計數可使用普通光學顯微鏡法、網織細胞計數儀法和血細胞分析儀法。前者的原理是網織紅細胞經體外活體染色,其胞體內RNA的磷酸基帶有負電荷,能與新亞甲藍、煌焦油藍、中性紅等堿性染料帶正電荷的有色反應基團結合,后兩種方法與此不同,是用熒光染料(如吖啶橙、派若寧-Y)使網織紅細胞內RNA著色。因此,本題正確答案是B。
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